《基因工程(第4版)》张惠展【pdf】

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目录

第1章 概述
1.1 基因工程的基本概念
1.1.1 基因工程的基本定义
1.1.2 基因工程的基本过程
1.1.3 基因工程的基本原理
1.1.4 基因工程的基本体系
1.2 基因工程的发展历史
1.2.1 基因工程的诞生
1.2.2 基因工程的成熟
1.2.3 基因工程的腾飞
1.3 基因工程的研究意义
1.3.1 第四次工业大革命
1.3.2 第二次农业大革命
1.3.3 第四次医学大革命
第2章 DNA重组克隆单元操作
2.1 DNA重组的载体
2.1.1 质粒载体
2.1.2 病毒或噬菌体载体
2.1.3 噬菌体一质粒杂合载体
2.1.4 人造染色体载体
2.2 DNA的体外重组(切与接)
2.2.1 限制性核酸内切酶
2.2.2 T4一DNA连接酶
2.2.3 其他用于DNA重组的工具酶
2.2.4 DNA切接反应的影响因素
2.2.5 DNA分子重组的方法
2.3 重组DNA分子的转化与扩增(转与增)
2.3.1 重组:DNA转化的基本概念
2.3.2 细菌受体细胞的选择
2.3.3 细菌受体细胞的转化方法
2.3.4 转化率及其影响因素
2.3.5 转化细胞的扩增
2.4 转化子的筛选与重组子的鉴定(检)
2.4.1 基于载体遗传标记的筛选与鉴定
2.4.2 基于克隆片段序列的筛选与鉴定
2.4.3 基于外源基因表达产物的筛选与鉴定
2.5 目的基因的克隆
2.5.1 鸟枪法
2.5.2 cDNA法
2.5.3 PCR扩增法
2.5.4 化学合成法
2.5.5 基因文库的构建
第3章 大肠杆菌基因工程
3.1 外源基因在大肠杆菌中的高效表达原理
3.1.1 大肠杆菌表达系统的启动子
3.1.2 大肠杆菌表达系统的终止子
3.1.3 大肠杆菌表达系统的核糖体结合位点
3.1.4 大肠杆菌表达系统的密码子
3.1.5 大肠杆菌表达系统的mRNA稳定性
3.1.6 大肠杆菌表达系统的质粒拷贝数
3.2 大肠杆菌基因工程菌的构建策略
3.2.1 包涵体型重组异源蛋白的表达
3.2.2 分泌型重组异源蛋白的表达
3.2.3 融合型重组异源蛋白的表达
3.2.4 寡聚型重组异源蛋白的表达
3.2.5 整合型重组异源蛋白的表达
3.3 重组异源蛋白的体内修饰与体外复性
3.3.1 重组异源蛋白的稳定性维持
3.3.2 重组异源蛋白的糖基化修饰
3.3.3 包涵体型重组异源蛋白的体外溶解与变性
3.3.4 包涵体型重组异源蛋白的体外复性与重折叠
3.4 大肠杆菌工程菌培养的工程化控制
3.4.1 细菌生长的动力学原理
3.4.2 发酵过程的最优化控制
3.4.3 大肠杆菌工程菌的高密度发酵
3.4.4 基因工程菌的遗传不稳定性及其机制
3.4.5 改善基因工程菌遗传不稳定性的对策
3.5 利用重组大肠杆菌生产人胰岛素
3.5.1 胰岛素的结构及其生物合成
3.5.2 人胰岛素的生产方法
3.5.3 产重组人胰岛素大肠杆菌工程菌的构建策略
3.6 利用重组大肠杆菌生产人抗体及其片段
3.6.1 重组抗体的生产策略
3.6.2 由大肠杆菌生产重组抗体片段的优越性
3.6.3 产重组抗体片段大肠杆菌工程菌的构建
3.6.4 重组抗体及其片段表达产物的分离纯化
……
第4章 原核细菌基因工程
第5章 真菌基因工程
第6章 昆虫基因工程
第7章 高等动物基因工程
第8章 高等植物基因工程
第9章 第二代基因工程——蛋白质工程
第10章 第三代基因工程——途径工程
参考文献

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